COMMENT DETECTER LES ENDOTOXINES MASQUEES ?  L'externalisation est-elle la solution dans le cas de récupération de faible taux d'endotoxines (LER) ?

L'évolution des médicaments, des petites molécules vers des produits biologiques ne fait aucun doute. Par exemple, les anticorps et les protéines sont aujourd'hui déjà commercialisées . En effet, plus de 400 thérapies recombinantes ont été approuvées par la FDA, ce qui démontre les avantages des produits biologiques, notamment une efficacité et une spécificité accrues, ainsi qu'une réduction de la toxicité et du risque d'effets secondaires indésirables^1,2.

Malheureusement, les procédés utilisés pour produire des formulations biologiques stables présentent souvent un problème spécifique, à savoir celui de la détection des endotoxines. Les endotoxines sont des molécules lipopolysaccharides (LPS) provenant des parois cellulaires de bactéries à Gram négatif susceptibles de provoquer des réponses immunitaires sévères chez les patients et d'entraîner une septicémie, voire la mort³.

La détection des endotoxines fait partie intégrante du processus de contrôle qualité des médicaments. En effet, avant leur libération, tous les produits pharmaceutiques et dispositifs médicaux stériles qui entrent en contact avec le sang d'un patient, ou avec ses fluides cérébraux ou oculaires, doivent être testés pour détecter les endotoxines. Cependant, dans certains cas, la présence d'endotoxines masquées peut entraver la fiabilité de méthodes d'analyse des endotoxines et donner lieu à un phénomène connu sous le nom de  « faible récupération d'endotoxines » (LER)³.

Nous avons parlé à notre expert, le Dr Christian Faderl, pour en savoir plus sur les endotoxines masquées et sur les solutions existantes pour résoudre efficacement le problème de LER.

« La LER représente un grand risque pour la sécurité des patients, déclare le Dr. Faderl : Si un produit présente un problème de LER, l' endotoxine est masquée et vous empêche de détecter une contamination lors du contrôle qualité. Mais les endotoxines masquées peuvent toujours déclencher une réponse immunitaire.»

Plusieurs méthodes permettent actuellement de tester les endotoxines bactériennes : le lysat d'amoebocyte de limulus (LAL), le lysat d'amoebocyte de tachypleus (TAL) et le facteur C recombinant (rFC).

Cependant, toutes ces méthodes reposent sur une protéine connue sous le nom de facteur C, qui se lie aux molécules de LPS et déclenche une réaction ou une cascade de réactions permettant de détecter et de mesurer les endotoxines. A noter que le facteur C n'est activé par les LPS sous leur forme naturelle^{et agrégée. 3,4}

La fabrication des produits biologiques et des formulations de produits finis nécessitent souvent des tensioactifs pour empêcher l'agrégation des protéines et des tampons chélateurs pour maintenir un pH optimal. Cependant, ces composants peuvent agir sur la structure agrégée des LPS, qui peuvent se disperser en monomères. Ces monomères dispersés ne peuvent plus activer le facteur C et à ce stade, ils ne pourront pas être détectés par les tests d'endotoxine, entraînant des faux négatifs.^4-6

Le Dr Joseph Chen a signalé pour la première fois la problématique du LER lors de la réunion annuelle de la PDA en 2013. Le Dr Chen a montré que l'ajout de faibles niveaux d'endotoxine à des produits biologiques non dilués ne pouvait pas être détecté par les méthodes de détection d'endotoxine courantes. Depuis, plusieurs autres études ont démontré les effets du masquage des endotoxines et du LER.^7-10

VEUILLEZ REMPLIR LES INFORMATIONS SUIVANTES POUR TÉLÉCHARGER LE LIVRE BLANC ET LIRE L'INTÉGRALITÉ DE L'ARTICLE